Sujet de Thèse

Contexte

En chirurgie carcinologique, l'objectif principal est d'obtenir des marges chirurgicales suffisantes pour limiter au maximum les risques de récidive, tout en étant le plus conservateur possible (Egloff-Juras et al, 2021). Bien que l'évaluation histologique peropératoire ne soit pas toujours une pratique de routine, elle reste l'examen le plus fréquemment réalisé, soit par analyse de coupe congelée peropératoire, soit par cytologie d'empreinte tactile. Cet examen est effectué immédiatement après la chirurgie afin de vérifier que tout le tissu tumoral a été enlevé. L'analyse de la pièce opératoire se fait pendant l'intervention, sans que le prélèvement soit fixé. Ainsi, l'anatomopathologiste peut réaliser des coupes fines et les placer sur un plot gélifié pour congélation avant de les étudier au microscope avec une coloration à l'hématoxyline, éosine et safran (HES) rapide (Girardi FM et al, 2021). L'analyse des échantillons est cependant longue, nécessitant une coordination entre plusieurs spécialités et augmentant ainsi la durée de l'intervention. Le résultat de cette analyse peut être communiqué en 20 à 40 minutes en fonction des procédures de prélèvement et de l'organisation de l'unité de soins.

Par conséquent, il existe un besoin de techniques peropératoires fonctionnant en temps réel et ex vivo avec une résolution spatiale suffisante (< 1 mm), une interférence minimale dans la pratique quotidienne, offrant une instrumentation ergonomique et pratique pour le chirurgien. Dans un scénario clinique idéal, un diagnostic précis devrait être rendu en 5 à 10 minutes.

C'est dans ce contexte que les nouvelles approches non invasives utilisant les propriétés de l'imagerie confocale ont été testées en cancérologie, et en particulier sur les carcinomes basocellulaires (Cameron et al, 2019). L'une des caractéristiques uniques de l'imagerie confocale est que les examens histopathologiques ultérieurs, y compris l'immunohistochimie, ne sont pas influencés par cette technique, ce qui permet une corrélation directe et exacte. La méthode d'imagerie confocale produit des images du tissu qui se trouve directement dans le plan focal de l'objectif. L'échantillon étudié est éclairé dans le plan focal de l'objectif par une source lumineuse ponctuelle. En combinaison avec des colorants fluorescents, le contraste des différentes structures tissulaires peut être amélioré et les régions d'intérêt peuvent être mises en évidence (Grizzetti et al, 2022). Cette étude, utilisant des techniques de fluorescence, bénéficiera de la compétences des équipes du CRAN en fluorescence et en photothérapie (Marchal S et al, 2015 ; Leufflen L et al, 2018).

Synopsis

Ce travail de thèse sera basé sur le protocole HISTOBLOC dont l'investigateur principal est le Dr Gilles Dolivet. L'étude sera menée au CRAN, sur le site de l'Institut de Cancérologie de Lorraine. 45 tumeurs de 2 à 4 cm seront traitées en per-opératoire avec le scanner Histolog® afin de déterminer la qualité des marges d'exérèse des lésions. Ces mêmes tumeurs seront soumises au protocole de référence dans la détermination des marges d'exérèse des tumeurs : l'analyse histologique extemporanée par un médecin spécialiste en anatomie pathologique. Les résultats des deux méthodes seront comparés afin d'évaluer la concordance du diagnostic peropératoire de l'état des marges de résection. L'objectif principal du travail de thèse est d'obtenir suffisamment d'arguments pour établir un protocole de non-infériorité lors de l'utilisation du microscope confocal par rapport à l'analyse histologique extemporanée, pour évaluer la qualité des marges péri-tumorales dans les chirurgies d'exérèse de carcinomes cutanés et de carcinomes épidermoïdes de la muqueuse orale ou oropharyngée. L'objectif secondaire est la constitution d'un atlas de référence d'imagerie confocale de coupes de carcinomes épidermoïdes, utilisables dans un futur logiciel d'intelligence artificielle qui serait capable d'identifier en per-opératoire les zones suspectes.

Bibliographie

Cameron MC, Lee E, Hibler BP, Giordano CN, Barker CA, Mori S, Cordova M, Nehal KS, Rossi AM. Basal cell carcinoma: Contemporary approaches to diagnosis, treatment, and prevention. J Am Acad Dermatol. 2019 Feb;80(2):321-339.

Claire Egloff-Juras, Lina Bezdetnaya, Gilles Dolivet, Henri-Pierre Lassalle. NIR fluorescence-guided tumor surgery: new strategies for the use of indocyanine green. International Journal of Nanomedicine, 2019, 14, pp.7823-7838.

Girardi FM, Wagner VP, Martins MD, Abentroth AL, Hauth LA. Factors associated with incomplete surgical margins in basal cell carcinoma of the head and neck. Braz J Otorhinolaryngol. 2021 Nov-Dec;87(6):695- 701

Grizzetti L, Kuonen F. Ex vivo confocal microscopy for surgical margin assessment: A histology-compared study on 109 specimens. Skin Health Dis. 2022 Jan 10;2(2):e91

Léa Leufflen, Aurélie François, Julia Salleron, Catherine Barlier, Gilles Dolivet, et al.. Photodynamic diagnosis with methyl-5-aminolevulinate in squamous intraepithelial lesions of the vulva: Experimental research. PLoS ONE, 2018, 13 (5), pp.e0196753.

Sophie Marchal, Gilles Dolivet, Henri-Pierre Lassalle, François Guillemin, Lina Bezdetnaya. Targeted photodynamic therapy in head and neck squamous cell carcinoma: heading into the future. Lasers in Medical Science, 2015, 30 (9), pp.2381-2387.